如果你使用的是WinPE系统的启动盘，其实更推荐在进入PE环境后，把ISO镜像复制到电脑硬盘里再进行安装。因为U盘的读写速度普遍比硬盘慢很多，从U盘读取镜像安装系统会非常耗时，复制到硬盘能大幅缩短等待时间。
重装系统时，已制作好的U盘启动盘能否再放入ISO镜像文件且不影响启动效果？
理论上来说，在已经制作好的启动U盘里存放ISO镜像文件是不会影响启动效果的。因为启动盘在引导时主要读取的是引导区和相关启动文件，而ISO镜像文件通常只被视为普通数据存储在分区中，两者互不干扰。
当然，如果你只是简单地把镜像文件放进U盘文件夹，且不打算立刻安装，那确实没有任何影响。启动盘的引导功能独立于数据分区的内容，只要引导文件没有被误删或覆盖，存放ISO文件对U盘启动能力完全没有副作用。
不过，虽然技术上可行，但我建议尽量避免这样做。毕竟U盘的数据安全性本身就不如硬盘高，将系统镜像这种重要文件直接放在U盘里，一旦U盘出现接触不良或损坏，安装过程可能会中断，导致系统安装失败。