5.25寸光驱位硬盘盒能否用于3.5寸硬盘？

是可以的，这种光驱盒的设计初衷就是支持3.5英寸的设备。你只需要把光驱抽出来，换上一块同尺寸的IDE硬盘即可。不过要注意，IDE接口的硬盘比较老旧，供电和数据线可能都需要确认一下接触是否良好，确保能稳定工作。